Clostridium difficile

Clostridientoxine in neuem Licht

Autokatalytische Spaltung aktiviert Toxin B aus Clostridium difficile (C. difficile)

Durchfälle bis hin zur pseudomembranösen Colitis sind häufige Komplikationen bei einer Antibiotikatherapie. Der Grund: Die Antibiose bringt die natürliche Darmflora aus dem Gleichgewicht, so dass schädliche Keime wie C. difficile die Oberhand gewinnen.

Diese Bakterien produzieren toxische Proteine. Sie bestehen aus einer langen Polypeptidkette, die drei funktionell unterschiedliche Abschnitte aufweist: Das carboxy-terminale Ende bindet an die Membran der Wirtszelle, der mittlere hydrophobe Bereich ist am Transport des Toxins durch die Zellmembran beteiligt und im Aminoterminus verbirgt sich ein Enzym, das für die schädliche Wirkung verantwortlich ist. Durch eine Spaltung des Toxins wird es freigesetzt und aktiviert.

Bisher vermutete man, dass eine Aspartatprotease in der Wirtszelle die Spaltung der Toxine bewerkstelligt. Christoph von Eichel-Streiber, Universität Mainz und Mitinhaber der Mainzer tgcBIOMICS, konnte gemeinsam mit seinen Mitarbeitern diese Hypothese widerlegen und einen autokatalytischen Weg für die Spaltung von Toxin B aus C. difficile nachweisen [Nature 2007, 446, 415-419]. Ihre experimentelle Vorgehensweise ist in Abb.1 dargestellt.

Toxin B bindet an einen Rezeptor auf der Zellmembran und gelangt via Endozytose in die Wirtszelle. Der saure pH in den Endosomen sorgt für eine Konformationsänderung der Polypeptidkette. Daraufhin durchdringt die hydrophobe Domäne des Toxins die Endosomenmembran und schiebt dabei die katalytische Domäne ins Zytosol. Dort bindet zelluläres Inositolphosphat an das Toxin und aktiviert über eine weitere Konformationsänderung die intrinsische Protease. Die autokatalytische Spaltung des Proteins setzt die aktive Glykosyltransferase aus dem Toxin frei, die zelluläre GTPasen der Rho/Rac-Familie (kleine GTP-bindende Proteine, die am Aufbau des Zytoskeletts beteiligt sind) glykosyliert und sie dadurch inaktiviert (siehe Abb. 2). Dies führt schließlich zur Zerstörung des Zytoskeletts und zum Tod der Wirtszelle.